Spectrophotométrie UV-visible en 1ère
Spectrophotométrie UV-visible, c'est une notion de biotechnologies du chapitre « Techniques de laboratoire en biotechnologies », au programme de 1ère. Voici le cours, un exemple et de quoi t'entraîner.
Spectrophotométrie UV-visible : le cours
Technique qui mesure la quantité de lumière absorbée par une solution à une longueur d'onde donnée, dans le visible (solutions colorées) ou dans l'ultraviolet (par exemple 280 nm pour les protéines, 260 nm pour les acides nucléiques). Plus la solution est concentrée, plus elle absorbe de lumière.
Exemple
Quand tu mets des lunettes de soleil, elles absorbent une partie de la lumière. La spectrophotométrie fonctionne pareil : elle mesure combien de lumière passe à travers une solution.
À retenir
La loi de Beer-Lambert relie l'absorption à la concentration : $A = \varepsilon \times l \times c$ où A est l'absorbance (sans unité), ε le coefficient d'absorption, l l'épaisseur de la cuve et c la concentration ; elle n'est valable que pour des solutions assez diluées.
S'entraîner sur spectrophotométrie uv-visible
Fais l'exercice, puis demande au tuteur de te corriger pas à pas.
Exercice 1
Une solution de protéine est placée dans un spectrophotomètre réglé à 280 nm. L'absorbance mesurée est 0,5. On donne le coefficient d'absorption massique de cette protéine : $\varepsilon = 1{,}4$ $\text{L·g}^{-1}\text{·cm}^{-1}$, et l'épaisseur de la cuve : l = 1 cm. Calcule la concentration massique de la protéine.
Corrige cet exercice avec le tuteur →Exercice 2
Tu dois séparer trois protéines (A, B, C) d'un mélange. La protéine A a une masse de 20 kDa, B de 50 kDa et C de 100 kDa. Quelle technique choisirais-tu et pourquoi ? Explique comment les protéines se sépareraient.
Corrige cet exercice avec le tuteur →Cette notion fait partie du chapitre Techniques de laboratoire en biotechnologies (Biotechnologies 1ère).